Заказ № 2450. Тихоокеанский государственный университет. Лабораторная работа по дисциплине: Химия. «Аминокислоты и белки».

Тихоокеанский государственный университет

Лабораторная работа по дисциплине: Химия. «Аминокислоты и белки».

Работа выполнена и оформлена на отлично.

Принята с первого раза, без доработок.

После покупки вы получите файл Word (20 стр. с титульником)

В работе выполнены задания, представленные ниже, в оглавлении. Всё задание в прикрепленном демо-файле, так как на сайте некорректно отображаются формулы и символы.

РАЗДЕЛ 1.    ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ АМИНОКИСЛОТ

Формулы некоторых аминокислот, входящих в состав белков, приведены в приложении.

ОПЫТ 1. Изучение кислотно-основных свойств a-аминокислот

а-Аминокислоты имеют две различные функциональные группы группы: карбоксильную (–СООН) и аминогруппу (–NН ₂) и являются гетерофункциональными соединениями. Аминогруппа обусловливает

основные свойства вещества, а карбоксильная – кислотные, именно поэтому

а-аминокислоты являются амфотерными соединениями, т. е. образуют соли как с кислотами, так и со щелочами:

Н₂N-СН-СООН- NaOH - Н₂N-CN-COONa

          R                 HCl   - CL[H ₃N-CH-COOH] 

                                                            R

Водные растворы а-моноаминокарбоновых кислот имеют почти нейтральную среду и существуют в виде биполярных ионов (цвиттер-ионы), представляющих собой внутреннюю соль:

            +

H₃ N–СН₂–СОО¯.

В биполярном ионе карбоксильная группа диссоциирована (–СОО–), а аминогруппа протонирована        

+

H₃N.   Ионизация молекул а-аминокислот зависит от рН раствора:

     +                  - н+                    - н+

H₃ N- СН- СООН-Н₃ N- СН-COO- Н₂N-СН- СОО

            R            +н+         R                       R

В зависимости от строения молекулы в водных растворах а- аминокислот могут преобладать либо кислотные, либо основные свойства.

Реактивы: 1%-ные растворы гликокола, глутаминовой кислоты, лизина, метиловый красный, фенолфталеин, синяя и красная лакмусовая бумага

Выполнение опыта. Возьмите три предметных стекла. На одно стекло нанесите на некотором расстоянии две капли раствора гликокола, на другое две капли раствора глутаминовой кислоты, на третье две капли раствора лизина. Затем к одной из двух капель раствора a-аминокислоты на предметных стеклах добавьте по одной капле раствора фенолфталеина, а к другой капле – по одной капле метилового красного. Отметьте изменение окраски индикаторов.

Проверьте на лакмус растворы a-аминокислот.

Запись данных опыта

1. Напишите уравнение диссоциации а-аминокислот.

2. Объясните изменение окраски индикаторов в водных растворах аминокислот.

3. Сделайте вывод о кислотно-основных свойствах а-аминокислот.

ОПЫТ 2. Обнаружение карбоксильной группы в а-аминокислотах (формольное титрование)

Для определения карбоксильной группе в водных растворах а-аминокислот необходимо связывать аминогруппы, которые образуют внутренние соли с карбоксильной группой, мешающие титрованию. С этой целью используют формальдегид. Реакция протекает по уравнению:

Н₂N-СН₂-СООН+НСНО-ОНСН₂- NН-СН₂- СООН

ОНСН₂- NН- СН₂- СООН+НСНО-(ОНСН₂)₂N- СН₂- СООН

Реактивы: 1%-ный раствор гликокола, 40%-ный раствор формальдегида (формалин), 0,5%-ный раствор гидроксида натрия, фенолфталеин

Выполнение опыта. В две пробирки внесите по пять капель раствора гликокола и по одной капле раствора фенолфталеина. В одну из пробирок добавьте одну каплю формалина. В обе пробирки по каплям добавьте раствор гидроксида натрия. Посчитайте число капель гидроксида натрия, вызывающее изменение окраски индикатора.

Запись данных опыта

1.              Запишите уравнения реакции взаимодействия гликокола с формальдегидом и реакции нейтрализации гидроксида натрия образовавшейся и иминокислотой.

2. Для чего добавляют формальдегид к раствору а-аминокислоты?

3. Назовите полученные соединения.

ОПЫТ 3. Обнаружение аминогруппы в а-аминокислотах

(реакция Ван Слайка)

Это реакция определения первичной аминогруппы в алифатических аминах.

а-Аминокислоты, содержащие первичную аминогруппу, реагируют с азотистой кислотой. При этом образуется неустойчивое диазосоединение, разлагающееся с выделением свободного азота и образованием а- гидроксикарбоновых кислот:

НООС СН NH₂+O=N OH –--

             R           азотная -Н₂О

  а-аминокислота

                           (NаNО₂+СН₃СООН(конц.))

-[ НООС- СН- N= N-ОН]- НООС-СН-OH+ N₂

                 R                                   R       

                                                 а-гидрокислота

На реакции взаимодействия аминогруппы с азотистой кислотой основан метод количественного газометрического определения их в аминокислотах, белках и продуктах их распада (метод Ван-Слайка).

Реактивы: 1 %-ный раствор гликокола, нитрит натрия, 10 %-ный раствор соляной кислоты

Выполнение опыта. В пробирку налейте по 0,5 мл раствора гликокола и соляной кислоты, добавьте 1 микрошпатель нитрита натрия. Встряхните пробирку. Что наблюдаете?

Запись данных опыта

1.        Запишите уравнения реакций взаимодействия соляной кислоты с нитритом           натрия и образовавшейся азотистой кислоты с а- аминокислотой.

2. Какой газ выделяется в ходе реакции?

ОПЫТ 4. Способность а-аминокислот к комплексообразованию

Для аминокислот характерно образование очень устойчивых окрашенных внутренних комплексных солей (хелатных комплексов).

Реактивы: 1%-ный раствор гликокола, кристаллические сульфат меди

(II) и ацетат натрия, 3%-ный раствор хлорида железа (III)

Выполнение опыта. В две пробирки налейте по 1мл раствора гликокола. В первую добавьте каплю хлорида железа (III), во вторую внесите по кристаллику сульфата меди (II) и ацетата натрия. Что наблюдаете?

Запись данных опыта

1.    Составьте уравнения реакций взаимодействия a-аминокислоты с хлоридом железа (III) и сульфатом меди (II). Продукты реакции запишите в виде хелатных комплексов.

РАЗДЕЛ 2.    ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ БЕЛКОВ

ОПЫТ 1. Отношение белков к кислотам и щелочам

Белки, состоящие из остатков аминокислот, также проявляют амфотерные свойства.

Основный характер белков проявляется при взаимодействии с кислотами:

                          HCl

Н₂ N-СН- СООН---[H₃N+ - CH-COOH]Cl-

           R                                R

Кислотный характер белков проявляется при взаимодействии с основаниями:

                         NaOH

Н₂ N-СН- СООН---H₂N - CH-COOHa

           R          -H₂O        R

В большинстве случаев кислотные свойства незначительно преобладают над основными, поэтому в водных растворах частица белка заряжена отрицательно и устойчива за счет одинакового заряда. При изменении рН раствора изменяются кислотно-основные свойства белков, частица теряет заряд и устойчивость и белок выпадает в осадок (коагулирует).

Реактивы: водные растворы белков, концентрированная уксусная кислота, 10%-й раствор гидроксида натрия

Выполнение опыта. В пробирки налейте по 1-2 мл раствора белка, добавьте по каплям концентрированную уксусную кислоту. Что Вы наблюдаете? Что происходит при дальнейшем добавлении уксусной кислоты?

Выпадение осадка в виде мути или хлопьев, ри дальнейшем добавлении кислоты осадок растворяется

Полученный раствор разделите на две пробирки. Одну из них нагрейте до кипения. Происходит ли что-нибудь с раствором? Свертываение белка не наблюдается

Во вторую пробирку постепенно добавьте раствор щелочи для нейтрализации кислоты. Что происходит с раствором при полной нейтрализации? Что Вы наблюдаете при добавлении избытка щелочи? Нагрейте содержимое пробирки. Происходят ли какие-либо изменения?

При постепенной нейтрализации кислоты образуется осадок белка, снова растворяющийся в избытке щелочи. Добавив еще 1,5 мл раствора щелочи, нагревают полученную жидкость до кипения; при этом белок не свертывается. Если раствор белка не слишком разбавлен, то при кипячении с избытком щелочи обнаруживается отщепление аммиака и сероводорода.

Запись данных опыта

1.              Запишите в общем виде уравнение диссоциации молекул белка по типу основания и по типу кислоты.

2.              В какой форме находится молекула белка в изоэлектрической точке?

3. Объясните поведение белков при добавлении недостатка и избытка кислоты, недостатка и избытка щелочи.

4. Запишите схемы образования устойчивых заряженных коллоидных частиц в кислой и щелочной средах.

5. Почему раствор белка в избытке кислоты и избытке щелочи не коагулирует при нагревании?

ОПЫТ 2. Реакции осаждения белков

Белки в растворе и соответственно в организме сохраняются в нативном состоянии за счет факторов устойчивости, к которым относятся заряд белковой молекулы и гидратная оболочка вокруг нее. Удаление этих факторов (высокая температура, добавление насыщенных растворов солей и концентрированных кислот, органических веществ, растворителей и др.) приводит к склеиванию молекул белков и выпадению их в осадок. Осаждение белков может быть обратимым и необратимым в зависимости от реактивов и условий реакции.

Различают обратимое и необратимое осаждение.

Обратимое осаждение протекает без изменения пространственной структуры и свойств белковой молекулы и заключается в дегидратации и потери заряда молекул белка. Под действием определенных веществ происходит выпадение белка в осадок, а при их удалении или разбавлении белок снова растворяется. К таким веществам относят соли щелочных металлов, аммония и магния, концентрированных минеральных кислот, кроме азотной, а также органические растворители.

Необратимое осаждение (свертывание) протекает с глубоким внутренним изменением структуры белка и потерей свойств; выпавший в осадок белок не растворяется. Необратимое осаждение происходит при

нагревании   (кипячении), действии       концентрированных минеральных и органических кислот, солей тяжелых металлов.

Обратимое осаждение белков

ОПЫТ 2.1. Высаливание белков из растворов сернокислым аммонием

Одним из видов обратимого осаждения белков является высаливание. Насыщенный раствор сульфата аммония осаждает альбуминовую фракцию, полунасыщенный раствор – глобулиновую.

Реактивы: водные растворы белков, насыщенный раствор сульфата аммония, порошок сульфата аммония

Выполнение опыта. В пробирку налейте 1 мл раствора белка, добавьте равный объем насыщенного раствора сульфата аммония и слегка встряхните смесь. Что наблюдаете? -Осадок. Отлейте 1 мл раствора от мутной жидкости, добавьте в нее 2-3 мл воды и встряхните. Что произошло с осадком? -Растворился осадок

Оставшуюся часть мутной жидкости отфильтруйте и к фильтрату добавьте порошок сульфата аммония до прекращения растворения соли. Что наблюдаете? -Осадок. Добавьте в нее 2-3 мл воды и встряхните. Что произошло с осадком? -Растворился осадок

Запись данных опыта

1. Какая фракция выделяется при добавлении насыщенного раствора

сульфата аммония, а какая при добавлении порошка сульфата

аммония?

2. Почему при добавлении сульфата аммония образуется осадок, а при

разбавлении осадок растворяется?

3. В чем заключается сущность этой реакции?

Необратимое осаждение белков

ОПЫТ 2. 2. Осаждение белков при нагревании

Белки при нагревании свыше 50-60 ºС легко денатурируются.

Сущность тепловой денатурации заключается в разрушении гидратной

оболочки, разрыве стабилизирующих белковую молекулу связей и

развертывании белковой молекулы. Наиболее полное и быстрое осаждение

наблюдается в изоэлектрической точке. Белки, обладающие кислотными

свойствами, осаждаются в слабокислой среде, а белки, обладающие

основными свойствами, осаждаются в слабощелочной среде. В сильнокислых

или сильнощелочных растворах денатурированный при нагревании белок в

осадок не выпадает, т. к. его частицы перезаряжаются и несут в первом

случае положительный, а во втором – отрицательный заряд, повышающий их

устойчивость в растворе.

Реактивы: водные растворы белков, 1%-ный и 10%-ный раствор

уксусной кислоты, 10%-ный раствор гидроксида натрия

Выполнение опыта. В четыре пробирки налейте по 10 капель раствора

яичного белка. В первую пробирку добавьте 1 каплю 1% раствора уксусной

кислоты; во вторую пробирку добавьте 1 каплю 10% раствора уксусной

кислоты; в третью пробирку прилейте 1 каплю раствора гидроксида натрия.

Нагрейте все четыре пробирки до кипения и отметьте изменения.

Запись данных опыта

1. Объясните причину различного поведения белков при нагревании.

2. В каких случаях белок выпадает в осадок, а в каких случаях не

образуется?

3. Почему этот процесс необратимый?

2. 3. Осаждение белков концентрированными кислотами

Концентрированные кислоты (серная, соляная, азотная и др.) вызывают

денатурацию белка за счет удаления факторов устойчивости белка в растворе

(заряда и гидратной оболочки). Однако в избытке соляной и серной кислот

выпавший осадок денатурированного белка снова растворяется, в избытке

азотной кислоты растворения осадка не происходит.

Реактивы: водные растворы белков, концентрированная соляная

кислота,

концентрированная азотная кислота

Выполнение опыта. Возьмите две пробирки и налейте в одну 1 мл

концентрированной азотной кислоты, в другую 1 мл концентрированной

соляной кислоты. Наклоняя каждую пробирку, осторожно по стенке влейте 1

мл раствора белка так, чтобы растворы не смешивались. Аккуратно поставьте

пробирки в штатив. Что Вы наблюдаете? Встряхните пробирки, перемешав

их содержимое. Что произошло после этого?

Запись данных опыта

1. Объясните, почему на границе раздела фаз «кислота – раствор белка»

образуется осадок?

2. Почему в избытке соляной кислоты осадок растворяется, а в избытке

азотной кислоты произошли необратимые изменения?

ОПЫТ 2. 4. Осаждение белков солями тяжелых металлов

Белки при взаимодействии с солями свинца, меди, ртути, серебра и

других тяжелых металлов в очень малых концентрациях денатурируются и

выпадают в осадок. Однако при избытке некоторых солей наблюдается

растворение первоначально образовавшегося осадка. Это связано с

накоплением ионов металла на поверхности денатурированного белка и

появлением положительного заряда на белковой молекуле. При отравлениях

тяжелыми металлами в качестве противоядия принимается яичный белок.

Реактивы: водные растворы белков, 20%-ный раствор ацетата

свинца (II), насыщенный раствор сульфата меди (II)

Выполнение опыта. В две пробирки налейте по 0,5 мл раствора белка

и медленно по каплям при встряхивании прилейте в одну пробирку раствор

сульфата меди (II), в другую раствор ацетата свинца (II). Что наблюдаете?

Разбавьте раствор большим количеством воды. Что произошло с осадком?

Запись данных опыта

1. Какие соединения образуют ионы тяжелых металлов с молекулами белка?

2. Где применяется эта реакция?

ОПЫТ 3. Коагуляция желатина спиртом

Желатин в растворах гидратирован в большей степени, чем другие

белки, поэтому достижения изоэлектрической точки недостаточно для его

коагуляции. Спирт энергично дегидратирует коллоидные частицы желатина,

что и приводит к выпадению его в осадок. В сильнокислой или щелочной

средах частицы желатина имеют значительный заряд, поэтому стабильны и

не коагулируют даже при добавлении спирта.

Реактивы: желатин, этиловый спирт, разбавленные растворы

соляной кислоты и гидроксида натрия

Выполнение опыта. В три пробирки поместите по 0,5 мл раствора

желатина. В первую пробирку добавьте 2 капли разбавленной соляной

кислоты, во вторую 2 капли разбавленного раствора щелочи. Затем во все

три пробирки прилейте по 0,5 мл спирта и встряхните. Что наблюдаете при

этом?

Запись данных опыта

1. В какой из пробирок наблюдается коагуляция желатина?

2. Объясните, почему этиловый спирт вызывает коагуляцию желатина?

3. Почему в избытке кислоты и щелочи желатин не коагулирует при

добавлении спирта?

ОПЫТ 4. Денатурация белков фенолом

В молекуле белка имеются свободные аминогруппы, которые

взаимодействуют с фенолом и образуют малорастворимые продукты

конденсации, что приводит к появлению мути, хлопьев или сгустков и

осаждению белка из раствора.

Реактивы: яичный белок или желатин (нейтральный раствор),

насыщенный водный раствор фенола

Выполнение опыта. В пробирку налейте 1 мл раствора яичного белка.

Для проведения опыта щелочной раствор белка необходимо предварительно

нейтрализовать, для чего осторожно добавьте разбавленную уксусную

кислоту до кислой реакции по лакмусовой бумаге. Затем к подготовленному

раствору белка добавьте по каплям раствор фенола. Что Вы наблюдаете?

Запись данных опыта

1. Укажите причины денатурации белков фенолом.

2. Составьте уравнение взаимодействия белковой молекулы с фенолом.

ОПЫТ 5. Цветные реакции белков

Для аминокислот, постоянно встречающихся в составе белков,

разработано множество цветных (в том числе именных) реакций. Многие из

них высокоспецифичны, что позволяет определять ничтожные количества

той или иной аминокислоты. Надо помнить, что все качественные реакции –

это реакции не собственно на белки, а на определенные аминокислоты,

входящие в их состав.

ОПЫТ 5.1. Биуретовая реакция белков (реакция Пиатровского)

В белках аминокислоты связаны друг с другом по типу полипептидов.

Образование полипептидов из аминокислот происходит путем отщепления

молекулы воды от аминогруппы одной молекулы аминокислоты и

карбоксильной группы другой молекулы:

                 O                         O

CH-CH-C        + CH₃-CH-C           ----

      NH₂    OH           HNH

                O                      O

CH-CH-C ----NH- CH-C         +H₂O       

      NH₂                CH₃     OH   

Образующаяся группа –СО–NН– называется пептидной группой, связь

С–N, соединяющая остатки молекул аминокислот, – пептидной связью. При

взаи-модействии дипептида с новой молекулой аминокислоты получается

трипептид и т. д.

Пептидные связи (– СО– NH–) способны образовывать с сульфатом

меди в щелочной среде окрашенные комплексные соединения. Цвет

комплекса зависит от длины полипептидной цепи. Дипептиды дают синюю

окраску, трипептиды – фиолетовую, полипептиды – красную, белки – сине-

фиолетовую.

Биуретовая реакция является качественной реакцией

на пептидную связь(– СО– NH–) и характерна для всех белков

Реактивы: водные растворы белков, желатин, концентрированный

раствор гидроксида натрия, насыщенный раствор

сульфата меди (II)

Выполнение опыта. В пробирки налейте по 1 мл приготовленных

растворов белков, добавьте по 1 мл концентрированного раствора щелочи и

затем каплю (НЕ БОЛЬШЕ!) раствора сульфата меди. Что Вы наблюдаете?

Сравните Ваши наблюдения с наблюдениями в опыте 3 первого раздела.

ОПЫТ 5.2. Нингидриновая реакция белков (реакция Руэманна)

a-Аминокислоты образуют с нингидрином комплексные соединения,

окрашенные в сине-фиолетовый цвет (пурпур Руэманна), интенсивность

окраски которого пропорциональна количеству аминокислоты. Реакция

характерна для a-аминокислот, присутствующих в природных

аминокислотах и белках.

Реакция протекает по схеме:

+H₂N-CH-COOH ---

          R

а-аминокислота       

        O

+R C       +CO₂+3H₂O

         H

Реактивы: водные растворы белков, 0,5%-ный раствор нингидрина

Выполнение опыта. В пробирку внесите 5 капель раствора белка,

затем 5 капель нингидрина. Содержимое пробирки осторожно нагрейте до

появления окрашивания. Отметьте цвет раствора.

ОПЫТ 5.3. Ксантопротеиновая реакция белков

Эта реакция используется для обнаружения a-аминокислот,

содержащих ароматические радикалы. При добавлении азотной кислоты к

растворам белков, содержащих бензольные кольца, образуются

нитросоединения (полинитросоединения), имеющие желтую окраску. В

щелочной среде нитропроизводные этих a-аминокислот дают соли,

окрашенные в оранжевый цвет.

Ксантопротеиновую реакцию используют для обнаружения

в молекулах белка остатков ароматических аминокислот,

таких как фенилаланин, тирозин, триптофан

H₂N-CH-COOH                         H₂N-CH-COOH

      CH₂                                           CH₂      

                             HONO₂ (конц)                                 NaOH   

                               H₂O                                               H₂O 

                           H₂N-CH-COOH              

                                   CH ₂

                                                                           ONa     

                                                                        N   

                                                                           О

Реактивы: водные растворы белков, концентрированная азотная

кислота,

концентрированный раствор гидроксида натрия

Выполнение опыта. В пробирки внесите по 1 мл растворов белков и в

каждую добавьте концентрированной азотной кислоты. Нагрейте

образующийся осадок белка на горелке до кипения. Что происходит с

окраской осадка и раствора? Охладите смесь, осторожно по каплям добавьте

в пробирку 1-2 мл концентрированного раствора щелочи. Что наблюдаете?

Запись данных опыта

1. Запишите уравнение реакции нитрования остатков ароматических

аминокислот белковой молекулы.

2. В результате чего появляется желтое окрашивание раствора?

3. Почему в щелочной среде наблюдается переход желтой окраски в

оранжевую?

ОПЫТ 5.4. Реакция на серу в белках (реакция Фоля)

Качественной реакцией на серосодержащие α-аминокислоты является

реакция Фоля. Белки, содержащие сульфгидрильные группы – SH,

подвергаются щелочному гидролизу. «Слабосвязанная сера» в цистеине и

цистине достаточно легко отщепляется, в результате чего образуется

сероводород, который, реагируя со щелочью, образует сульфиды натрия или

калия.

14

Реакцию на серу используют для обнаружения в молекулах белка

серосодержащих аминокислотных остатков,

таких как цистин и цистеин

                                  CH₂SH                         CH₂OH

                               CHNH₂ + 2NaOH---CHNH₂+Na₂S-H₂O

                                COOH                          COOH   

                                          цистеин          серин

Для выявления сульфида натрия используют ацетат свинца, который

при взаимодействии с гидроксидом натрия превращается в его плюмбит:

Pb(CH₃COO) ₂ + 2NaOH --- Pb(ONa) ₂ + 2CH₃COOH

При добавлении ацетата свинца(II) образуется осадок сульфида

свинца(II) серо-черного цвета:

Na₂S + Pb(ONa) ₂ + 2H₂O --- PbS + 4NaOH

черный осадок

Реактивы: растворы белков, 30 %-ный раствор гидроксида натрия,

водный раствор ацетата свинца (II)

Выполнение опыта. В пробирки налейте по 1 мл раствора белка и

гидроксида натрия. Затем добавьте 3-4 капли раствора ацетата свинца (II).

Нагрейте содержимое пробирок в течение 5 мин до кипения. Что

наблюдаете?

Запись данных опыта

1. Какое соединение выделяется в виде коричнево-черного осадка?

2. Наличие каких возможных связей определяет данная реакция?

ОПЫТ 5.5. Открытие азота в белках

Реактивы: растворы белков, концентрированный раствор гидроксида

натрия, красная лакмусовая бумага

Выполнение опыта. В пробирку налейте 0,5 мл раствора белка и

добавьте двойной объем гидроксида натрия. Поднесите влажную

лакмусовую бумагу к отверстию пробирки и осторожно, чтобы не произошло

выбрасывания жидкости, кипятите смесь в течение 2-3 мин. Что наблюдаете?

Отметьте запах выделяющегося газа.

15

Запись данных опыта

1. Напишите уравнение реакции гидролиза белка в присутствии щелочи.

2. Какой газ выделяется в ходе реакции?

ОПЫТ 5.6. Открытие гетероциклического азота в белках

Реактивы: растворы белков, концентрированная соляная кислота

Выполнение опыта. В пробирки поместите по 10 капель

концентрированной соляной кислоты и по 2 капли раствора белка.

Осторожно нагрейте пробирки, не доводя до кипения. Что наблюдаете?

В присутствии триптофана раствор окрашивается в фиолетовый цвет

ОПЫТ 5.7. Действие температуры на белки

При внесении белковых материалов в пламя ощущается характерный

запах жженых перьев или «паленого». Этот способ используется как

наиболее простой для распознавания белковых тел. Шерсть и натуральный

шелк горят медленно и как белковые тела дают при этом характерный запах.

Хлопковое волокно и искусственный шелк, состоящие в основном из

клетчатки, горят быстро с выделением запаха жженой бумаги.

Выполнение опыта. Внесите в пламя горелки пучок шерсти, волос, нитей,

перья птицы и другие белковые тела. Отметьте поведение материалов в

пламени.

Пожалуйста, внимательно изучайте оглавление работы. Деньги за приобретённую готовую работу, по причине несоответствия данной работы вашим требованиям, или её уникальности, не возвращаются, поскольку цена значительно дешевле, чем заказывать новую работу.

Также, при необходимости, после покупки Вы можете заказать на данном сайте необходимые дополнения к работе.