Оформить 1 лабораторную работу

Определение белковых фракций муки Цель работы: освоить методику выделения белковых фракций из исследуемого материала. Материалы и оборудование: раствор сернокислого калия с массовой долей 5 %, раствор сернокислой меди с массовой долей 6 %, раствор гидроксида натрия с массовой долей 0,2 %, раствор хлорида натрия с массовой долей 10 %, 0,1 н раствор уксусной кислоты, порошок сульфата аммония, центрифуга, водяная баня, мерные колбы, фарфоровые ступки, фильтровальная бумага. Ход работы: Выделение водорастворимых белков пшеницы. Пшеничную муку в количестве 2 г растереть в фарфоровой ступке с 10 мл дистиллированной воды. Полученной смеси дать отстояться 2-3 мин, затем отфильтровать. Остаток муки промыть два раза небольшими порциями дистиллированной воды и оставить для последующего извлечения глобулинов пшеницы. Полученный фильтрат использовать при исследовании растворимости альбуминовых белков. К фильтрату альбуминовой фракции белков добавить сухой тонкоизмельченный порошок сульфата аммония при небольшом нагревании (не выше 40 °С) до полного насыщения (до прекращения растворения сульфата аммония). Выпавший осадок, представляющий собой альбуминовую фракцию белков пшеницы, отфильтровать. Осадок на фильтре растворить в 1 мл дистиллированной воды. В полученном растворе доказать наличие белков, добавив в него 1 мл биуретового реактива. Выделение солерастворимых белков пшеницы. Промытый водой остаток муки (после извлечения альбуминовой фракции белков) растереть в ступке с 10 мл 10 % раствора хлорида натрия, дать отстояться 2-3 мин и отфильтровать. Остаток муки промыть два раза небольшими порциями свежего раствора хлорида натрия и оставить для следующих опытов. Полученный фильтрат использовать при исследовании растворимости глобулиновых белков пшеницы. Для этого добавить к фильтрату равный объем насыщенного раствора хлорида натрия, достигнув тем самым полунасыщения. Выпавший осадок, представляющий собой глобулиновую фракцию белков пшеницы, отфильтровать. Осадок растворить на фильтре в 1 мл 10 % раствора хлорида натрия. Провести реакцию с биуретовым реактивом. Выделение белков пше­ницы, растворимых в щелочах. Остаток муки (после удаления альбуминовой и глобулиновой фра­кции белков) растере­ть в фарфоровой ступ­ке с 10 мл 0,2 % рас­твором гидроксида на­трия, дать отстояться 2-3 мин и отфильтр­овать. К фильтрату добавить по каплям 0,1 н раствор уксусной кислоты. Выпавший осадок представляет собой глютенин - глют­елин пшеницы. Выделение белков пше­ницы, растворимых в спиртах. В фарфоровой ступке растереть 1 г пшенич­ной муки с 5 мл 70 % этилового спирта. Полученной суспензии дать отстояться и от­фильтровать. К 3 мл фильтрата добавить по каплям дистиллиров­анную воду до выпаде­ния осадка. Полученн­ый осадок представля­ет собой глиадин - проламин пшеницы. Выделение водораство­римых белков гороха. Экстракцию белков ве­сти аналогично экстр­акции альбуминов пше­ницы. Выделение солераство­римых белков гороха (легумина). В гороховой муке сод­ержится глобулиновый белок легумин, нера­створимый в воде, но растворимый в раств­орах нейтральных сол­ей. Для извлечения легумина 5 г гороховой муки залить 20 мл 10 % раствора сульфа­та аммония и экстраг­ировать в термостате в течение 20 мин при температуре 30 °С (при постоянном пере­мешивании). Полученн­ый раствор отфильтро­вать через складчатый фильтр, смоченный раствором соли. Филь­трат использовать для исследования раств­оримости глобулиновых белков гороха. Для этого добавить к 1 мл фильтрата 1 мл на­сыщенного раствора хлорида натрия. Выпав­ший осадок легумина отфильтровать и раст­ворить на фильтре в 1 мл 10 % раствора хлорида натрия. Задания для выполнен­ия: На основании информа­ции, представленной в ходе работы, а так­же литературных исто­чниках, ответьте на следующие вопросы: 1. Объясните, почему для обнаружения бел­ковых фракций примен­яют биуретовый реакт­ив? Какую окраску пр­иобретает раствор бе­лка при добавлении к нему биуретового реакти­ва? 2. Что происходит с раствором альбумина при добавлении к нему солей аммония? 3. Чем отличаются пр­оцессы выделения и осаждения белков? 4. Каким образом мож­но получить в виде осадка глютелины пшен­ицы? 5. Опишите ход выдел­ения легумина гороха. 6. Заполните таблицу 1. Таблица 1 Результаты качествен­ного анализа фракцио­нного состава исследуемого белка Исходный материал Растворитель Название растворимого белка Реакция на белок